(录用定稿)网络首发时间:2019-06-12 11:16:01

目的建立有效的皮肤光老化HaCaT细胞模型,初步探索可能涉及的老化相关信号转导途径。方法本研究以30 mJ/cm2中波紫外线(ultraviolet B,UVB)辐照HaCaT细胞,通过CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术分析细胞周期,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法鉴定各组阳性细胞百分比,qRT-PCR和Western-blot技术检测衰老相关蛋白p53,p21和p16的表达,细胞免疫荧光检测p21蛋白胞内定位。结果CCK-8结果显示,30 m J/cm2 UVB辐照后HaCaT细胞增殖率均较对照组低(P=0.000)。细胞周期时相结果显示,30 mJ/cm2 UVB辐照后G2期细胞比例较对照组显著增加(P<0.05)。SA-β-gal染色结果显示,30 mJ/cm2 UVB辐照后,细胞染色阳性率明显高于对照组(P=0.000)。qRT-PCR和Western-blot结果均显示,p53、p16表达明显升高,但p21表达明显下降。细胞免疫荧光结果显示,给予30mJ/cm2UVB辐照导致p21发生明显的核移位。结论30 mJ/cm2的UVB辐照可成功构建光老化HaCaT细胞模型,其机制可能是通过增强p21核定位及激活p16通路诱导了细胞衰老的进程。

国家自然科学基金面上项目(81573027,81874238); 重庆市自然科学基金计划资助项目(cstc2016jcyjA0430);

光老化; 细胞模型; p53; p21; p16;

10.16016/j.1000-5404.201903210

R758.1

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