提出了优化分子内作用力提高蛋白A(SpA)的结构域Z分子稳定性的方法,构建了突变结构域Z’和Z’’。圆二色光谱分析结果表明,突变结构域具有与结构域Z一致的特征峰,但突变结构域Z’中α-螺旋含量明显高于突变结构域Z’’。在pH 6.0下,突变结构域Z’的热转变温度(T_m)较结构域Z提高了3.9℃,而突变结构域Z’’的Tm值仅提高了1.6℃。这表明,突变结构域Z’中第12位引入疏水性更大的Ile残基提高了结构域分子的稳定性。色谱介质耐碱性实验结果表明,突变结构域Z’具有更好的耐碱性,其耐碱性在突变结构域Z’四串联体融合蛋白中得到了进一步提升。研究工作为Sp A色谱配基的分子改造提供了新思路。

国家自然科学基金项目(21276189,21476166); 天津市应用基础研究计划项目(15JCYBJC48500); 生化工程国家重点实验室开放基金(2014KF-03)~~;

抗体; 吸附; 热力学; 蛋白A色谱; 示差扫描量热; 圆二色光谱; 耐碱性;

O629.73;TQ460

化工学报

CIESC Journal

2017年09期

ISSN:0438-1157

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493459-34657457K
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