苹果中多糖和黄酮类化合物肝损伤保护作用的药理活性研究

据大量文献报道,苹果中多糖类物质和黄酮类化合物具有多种生物活性,因其具有肿瘤防治、延缓机体衰老和抑制细菌滋生等药理功能,并且毒副作用较小,因此被广泛应用于医药、食品等领域。鉴于此,本实验精选杂交晚熟品种粉红女士为研究对象,进而采用本实验室比较成熟的分离分析技术,首次将果肉和果皮中苹果多糖和类黄酮化合物进行对比,对其结构特征和药理活性做了进一步研究。本实验的主要结论如下:1粉红女士果皮、果肉中多糖(APP和AFP)提取采用水提醇沉法,测得总糖含量分别为70.2%和61.7%;果皮、果肉类黄酮(APF和AFF)采用70%乙醇超声提取,总黄酮含量分别为4.82%和2.22%。2PMP柱前衍生化HPLC-UV分析结果显示:粉红女士果皮、果肉多糖主要由甘露糖(Man)、核糖(Rib)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(GlcUA)、半乳糖醛酸(GalUA)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xyl)、半乳糖(Gal)和阿拉伯糖(Ara)等单糖组成。上述单糖在苹果果皮多糖(APP)中对应的摩尔百分含量依次为8.0,0.8,7.3,4.6,13.1,8.3,4.8,25.0和27.9%;而在苹果果肉多糖(AFP)中对应的摩尔百分含量分别为3.0,1.7,7.6,4.2,18.6,9.0,9.1,17.0和29.7%。研究结果表明,苹果中类黄酮化合物测定的标准品主要有绿原酸(Chorogenic acid)、咖啡酸(Caffeic acid)、表儿茶素(Epicatechin)、芦丁(Rutin)、金丝桃苷(Quercetin-3-0-galactoside)、槲皮苷(quercetin-3-rhamnoside)、槲皮素(Quercetin)、根皮素(Phloretin)和染料木素(Genistein)。其在苹果果皮类黄酮(APF)中的含量依次为4.3,0.5,1.3,8.1,38.6,71.9,0.5,0.1和0.4mg/g;果肉(AFF)对应的含量分别为3.2,0.3,0.5,0.6,3.0,2.5mg/g,其中槲皮素、根皮素和染料木素在果肉中未被检测到。3结合DPPH自由基、超氧阴离子(02’-)自由基、羟自由基(HO")以及还原能力等四个评价体系对样品抗氧化活性进行评价,结果表明:APP、AFP、APF、 AFF在抗氧化方面均呈现较好的活性,且呈良好的剂量-效应关系。通过对比发现,APP和AFP随着浓度增加,活性强弱的对比并不明显,而APF和AFF中的对比却呈现出明显差别,APF的清除活性较强。4成功建立肝损伤小鼠模型,通过测定肝指数,血清中ALT、AST、LDH,以及肝脏匀浆中MDA、SOD和GSH-Px等多种酶的活性,同时结合病理石蜡切片观察,系统评价APP、AFP、APF和AFF对小鼠肝损伤的影响。结果显示经过四种样品处理过的组别和模型组相比肝指数(HI)出现明显的下降,血清中ALT、AST、LDH和肝脏匀浆中MDA酶含量减少,肝匀浆中SOD、GSH-Px两种酶含量升高。由此可见,APP、AFP、APF和AFF均具有小鼠肝损伤的保护作用,并且随样品浓度的升高保护作用增强,其中相同浓度下AFP比APP起到了更好的肝保护作用,而黄酮类化合物的作用则相反,在相同的浓度下APF的肝保护功能强于AFF。石蜡切片清楚地观察到模型组肝细胞的紊乱、细胞核固缩、边缘模糊、双核现象严重等现象,样品组别这种现象得到明显的改善,进一步说明了实验数据与结论的真实性和可依赖性。

苹果多糖; 苹果黄酮类化合物; HPLC; 抗氧化活性; 肝保护作用;

杨兴斌;

R285.5

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