(单篇优先)网络出版时间:2017-09-22 09:31:58

大肠埃希菌外膜囊泡作为新型外源质粒递送载体的研究

目的 探讨大肠埃希菌外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)作为新型 DNA 疫苗递送载体的潜力及价值。方法 从大肠埃希菌 DH5α的培养上清中经过滤、超滤、超速离心等步骤收集天然分泌的 OMVs,采用密度梯度离心法纯化 OMVs。将纯化后的 OMVs 与哺乳动物吞噬细胞及非吞噬细胞进行体外孵育,观察不同细胞对 OMVs 的摄取效率。通过电击转化方式将带绿色荧光蛋白的真核表达质粒 p IRES2-EGFP 转入 OMVs 中,并与 Raw264. 7 细胞共孵育,观察 OMVs 携带真核表达质粒进入细胞并表达绿色荧光蛋白的情况。结果 密度梯度离心法可有效纯化OMVs,纯化后的 OMVs 进入不同哺乳动物细胞的效率不同,进入吞噬细胞的效率高于非吞噬细胞,经电击转化后,质粒 DNA 可被导入 OMVs 中,并随吞噬细胞摄取及表达。结论 约 5 300 bp 的真核表达质粒可用电击方式导入OMVs 中,并通过 OMVs 介导该质粒在吞噬细胞中表达,提示 OMVs 具有作为新型质粒 DNA 递送载体的潜力。关键词: 细菌外膜囊泡;质粒;递送系统;DNA 疫苗

细菌外膜囊泡; 质粒; 递送系统; DNA疫苗;

10.13200/j.cnki.cjb.001881

1006266K
在线咨询 用户反馈