(单篇优先)网络出版时间:2017-09-22 10:12:58

马抗中东呼吸综合征冠状病毒特异性F(ab’)2的制备

目的采用免疫亲和层析技术纯化制备马抗中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndromecoronavirus,MERS-Co V)特异性Ig G与F(ab’)2。方法 以经MERS-Co V病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)对马匹进行多次免疫所制备的高免血清为原料,原核表达的MERS-Co V刺突蛋白S受体结合域(S-receptor binding domain,S-RBD)为抗原蛋白制备免疫亲和柱,提取制备抗原特异性Ig G或F(ab’)2。间接ELISA法检测各样品的活性,MERS假病毒中和试验检测样品的中和活性,BCA法测定样品的浓度,并计算收率。结果 所制备的特异性Ig G与特异性F(ab’)2的纯度分别为90.1%和92.8%,收率分别为8.7%和3.07%;在相同的浓度下,所制备的特异性Ig G或F(ab’)2的活性和中和活性均高于对照组中的血清总Ig G或总F(ab’)2。结论 成功制备了马抗MERS-Co V特异性Ig G或F(ab’)2,为建立更加安全与高效的抗MERS-Co V免疫球蛋白F(ab’)2制备工艺奠定了基础。

国家重点研发计划子课题(2016YFC1200902); 广州市健康医疗协同创新重大专项(201604020011);

中东呼吸综合征; 冠状病毒; 病毒样颗粒; 免疫亲和层析; 免疫球蛋白; F(ab’)2;

10.13200/j.cnki.cjb.001882

R373. 9 R392-33

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