(单篇优先)网络出版时间:2017-11-29 14:26:43

二次贴壁法获得的人脐带间充质干细胞的体外安全性及其对1型糖尿病大鼠血糖的调节作用

目的 探讨二次贴壁法获得的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCMSCs)的体外安全性及其对 1 型糖尿病(type 1 diabetes,T1D)大鼠血糖的调节作用,为临床 T1D 的治疗提供实验依据。方法 采用二次贴壁法从人脐带中进行多能干细胞的大规模培养,建立主细胞库(master cell bank,MCB)和工作细胞库(working cell bank,WCB),对干细胞的免疫表型、体外致瘤性、核型、端粒酶进行检测,以确定其体外安全性;通过干细胞体内移植试验初步分析其对 T1D 大鼠葡萄糖转化能力的影响。结果 以 1 根 20 cm 脐带作为材料,经二次贴壁分离扩增后,建立 MCB 共 250 管(P3 代)、WCB 共 250 管(P5 代),每管均 4 伊 106个 h UCMSCs。MCB和 WCB 细胞均高表达 CD73、CD90、CD105,低表达 CD34、CD45、CD14、CD79a 和 HLA鄄DR;染色体稳定、无体外致瘤性。将 WCB 细胞取出复苏扩增 1 代后移植 T1D 大鼠,6 周内,大鼠血糖水平较对照组(注射等量生理盐水)显著下降(P< 0. 05),且体重下降缓慢(P< 0. 05);6 周后,与对照组相比,移植组大鼠胰岛组织形态明显恢复,肝脏合成葡萄糖转运蛋白能力提高。结论 采用二次贴壁法获得的 h UCMSCs 所建立的 MCB 和 WCB 细胞生物特性一致,且具有良好的安全性。初步移植结果预示,T1D 大鼠 GLUT 蛋白表达提高可能与 h UCMSCs 改善肝脏糖原合成能力有关。关键词:人脐带间充质干细胞;二次贴壁;安全性;1 型糖尿病;葡萄糖转运蛋白

黑龙江省应用技术研究与开发计划项目(GA14C105); 黑龙江省自然基金(C201430).;

人脐带间充质干细胞; 二次贴壁; 安全性; 1型糖尿病; 葡萄糖转运蛋白;

10.13200/j.cnki.cjb.002012

Q2-33

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