(录用定稿)网络首发时间:2019-07-12 13:35:38

为了解启动子在茶树Ankyrin 基因(CsAnkyrin)表达调控中的作用,以茶树新品系“1005”嫩芽为材料,通过染色体步移技术克隆CsAnkyrin 基因启动子序列,利用Neural Network Promoter Prediction 和PlantCARE在线软件等对启动子序列进行生物信息学分析,将含有内含子和删除内含子的启动子序列(+intron/-intron)分别定向替换pCAMBIA1301表达载体的CaMV35S启动子,构建重组表达载体后分别转化拟南芥,并进行GUS组织化学染色分析。结果显示,克隆得到的CsAnkyrin启动子序列(命名为proAnk)为1 010 bp,含有一个5’UTR(5’untranslated regions,5’非编码区)内含子。启动子序列除含有启动子核心元件TATA-box和CAAT-box,还存在有激素响应元件、光响应元件、厌氧胁迫应答元件以及大量功能未知或功能特异的顺式作用元件。删除5’UTR内含子后的启动子序列能够驱动下游GUS报告基因表达,保留5’UTR内含子的启动子序列不能驱动下游GUS报告基因正常表达,但是RT-PCR实验结果表明5’UTR内含子在转录后没有被切除,而是和GUS基因一起转录产生融合mRNA。上述结果说明,proAnk具有诱导型启动子特性,5’UTR内含子对下游基因正常表达具有负调控作用,且可能是在翻译水平上对下游基因表达产生影响。(图7 表1 参32)

福建省高校杰出青年科研人才培育计划项目资助;

茶树; CsAnkyrin; 启动子; 顺式作用元件; 5’UTR内含子;

10.19675/j.cnki.1006-687x.2019.05011

S571.1;Q943.2

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