(录用定稿)网络首发时间:2019-07-23 16:46:40

对硫磷是一种广谱的有机磷酸酯类杀虫、杀螨剂,毒性极强,可对环境和人类健康造成严重危害。尽管我国已禁止使用对硫磷,但仍存在违禁使用现象,加强对其监测十分必要。纳米抗体是已知最小的与抗原结合的片段(15 kDa),来源于骆驼科动物体内重链抗体的可变区,具有稳定性强、灵敏度高、易表达、水溶性好等特性。本研究基于噬菌体展示技术构建了抗对硫磷纳米抗体库,其库容为2.41 × 107 cfu/mL,经抗原-抗体固相亲和筛选及噬菌体酶联免疫法(Phage ELISA)鉴定,获得5种抗对硫磷纳米抗体VHH1、VHH6、VHH13、VHH21和VHH24。以结合能力最强的VHH1为基础,采用同源建模和分子对接技术探讨VHH1与对硫磷分子的识别机制,发现VHH1与对硫磷存在氢键和疏水间分子作用力,关键氨基酸是Ser60、Lys104、Phe105、Gly106和Arg107。本研究为抗体的进化改造和半抗原的设计提供了新思路。

“十三五”重点研发计划项目(Nos.2016YFE0106000,2018YFC1602904); 广州市科技计划项目(No.201804020077); 国家自然科学基金项目(No.31271866); 广东省高等学校珠江学者岗位计划项目(2017)资助;

纳米抗体; 对硫磷; 噬菌体展示; 分子模拟;

10.19756/j.issn.0253-3820.181772

TB383.1;TQ450.7

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分析化学

Chinese Journal of Analytical Chemistry

ISSN:0253-3820

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