鸡蛋黄中的唾液酸化糖肽(Sialylglycopeptide,SGP)的肽段部分由6个氨基酸(KVANKT)组成,其中天冬酰胺(N)被唾液酸化的复杂型N-糖链修饰。SGP主要从鸡蛋黄中分离获得,现有的SGP分离纯化方法操作繁琐,成本较高,难以规模化制备。本研究基于亲水相互作用色谱技术,用医用脱脂棉作为亲水色谱柱的固定相,建立了一种从鸡蛋黄中分离纯化唾液酸化糖肽的方法。首先将鸡蛋黄经苯酚处理得到唾液酸化糖肽的粗品,然后将糖肽粗品用水配成150 mg/mL的溶液,加入制备好的棉花亲水色谱柱中,依次用100%、95%、85%、75%(V/V)的乙腈-水溶液进行除杂,最后用去离子水洗脱唾液酸化糖肽。本方法操作简单,成本低廉。利用本方法从50个鸡蛋黄中制备得到了300 mg SGP,经高效液相色谱(HPLC)鉴定,其纯度高达95%,同时采用电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对SGP及其糖链组成和糖基化位点进行了表征。

国家自然科学基金项目(Nos.31670808,31870798)资助~~;

唾液酸化糖肽; 亲水色谱柱; 脱脂棉; 鸡蛋黄;

10.19756/j.issn.0253-3820.191317

O652.63;O629.72

6834-3961954K
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